判斷Anti-ACA11蛋白降解程度，可通過?「外觀初篩→內(nèi)參驗證→靶標(biāo)信號比對」?三步精準(zhǔn)判定，結(jié)果對應(yīng)清晰的降解等級：

第一步：外觀快速初篩

先觀察蛋白樣本的狀態(tài)，初步劃分等級：

?正常無降解?：蛋白溶液澄清透明，無渾濁、沉淀或絮狀物

?可疑降解?：溶液輕微渾濁，無明顯沉淀

?明確重度降解?：出現(xiàn)明顯沉淀、絮狀物，溶液分層

第二步：內(nèi)參WB驗證（核心判定依據(jù)）

將待測樣本和?新鮮提取的同來源正常樣本?同時跑WB，檢測擬南芥管家基因內(nèi)參（Actin/UBQ，約40kDa）

第三步：結(jié)合Anti-ACA11靶標(biāo)信號確認(rèn)

因為ACA11是低豐度膜蛋白，比內(nèi)參更易降解，需要補充靶標(biāo)結(jié)果修正判定：

內(nèi)參正常，但ACA11信號比新鮮樣本下降超過50%：判定為輕度-中度降解

內(nèi)參正常，但ACA11無信號：判定為中度降解

內(nèi)參已經(jīng)模糊彌散，ACA11無信號：直接判定為重度降解